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Primerkonzentration
Bebsi232010-01-31 09:16:47
ProfilHey Leute!
Ich hab's grad nicht so mit Logik.
Die Originalprimerlösung hat jeweils eine Konzentration von ca 100 µmol/l.
Die Arbeitsverdünnung davon beträgt ca 10 µmol/l.
Für den PCR-Ansatz (gesamt 50 µl/Ansatz) werden 25 µl Mastermix (Puffer, Nucleotide, Polymerase); 13 µl PCR-Wasser, 5 µl Template-DNA, je 2 µl FemB 1/2; je 1 µl MecA 1/2 und je 0,5 µl 16S 1/2 pipettiert.
Molare Konzentrationen der Primer:
Fem B 1 130µmol/l
Fem B 2 130µmol/l
Mec A 1 106,6µmol/l
Mec A 2 124,6 µmol/l
16 S 1 131 µmol/l
16 S 2 129,9 µmol/l

Frage unserer Lehrerin lautet: Die Primer müssen in den Konzentrationen FemB 1/2 je 40 pmol/µl; Mec A 1/2 je 20 pmol/µl und 16S 1/2 je 10 pmol/µl im Ansatz vorliegen. Stimmt das?

Bin dankbar für jeden Tipp!!!!
acribio2010-02-03 08:15:07
ProfilHallo,

ich hab grad nicht soo viel Zeit, vielleicht helfen schon mal diese Links:
http://www.acribio.com/forum/f5-t119-Primer-umrechnen.html
und
http://www.acribio.com/forum/f5-t124-PCR-Primerkonzentration.html


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