Protein blot Westernblot <-> Elisa assay |
| TanjaK | 2007-09-03 20:38:06 |
Profil
Beitrag #1 • | Hallo,
ich habe mal eine Frage, ich hoffe die Frage passt hier ^^
Es gibt doch Western blot und wie sie alle heissen (Northern Blot, Southern Blot)
z. B. ein Borrelien Westernblot, als Borrelien Nachweis.
Das ist doch ein Nachweise für Proteine, also zur Proteinbestimmung, Bestimmung der Borrelien AK (Antikörper).
Was ist denn jetzt der Unterschied eines Western Blots zu einem
ELISA Assay.
ELISA Assays sind ja auch zur Proteinbestimmung, oder?
Wieso gibts denn zwei Methoden?
| | acribio | 2007-09-03 22:10:06 |
Profil
Beitrag #2 • | Hallo Tanja!
Willkommen im Forum!
Tolle Frage, die ist natürlich genau richtig hier ;)
passt schon.
Na du hast ja schon recht viel vorgelegt. Ich nehme mal an, dass du weisst, wie ein Western blot abläuft im Gegensatz zu einem Elisa Assay ? | | TanjaK | 2007-09-03 22:31:22 |
Profil
Beitrag #3 • | Ja - so ungefähr,
Westernblot: Protein Gel -> Blot auf Membran mit Strom (Elektroblot) -> Färbung mit Antikörpern
Elisa : 96 Well Platte, Verdünnungsreihe einer Proteinlösung (Eichreihe)
Verdünnungsreihe der eigenen Proteinlösung, coating des Proteins an den Boden der Platte, X Waschvorgänge, dann Immunreaktion des Antikörpers mit dem Antigen - > Farbreaktion oder Farbmarkierte Antikörper,
diese werden dann in einem UV / VIS -Spektrometer detektiert. | | TanjaK | 2007-09-03 22:35:35 |
Profil
Beitrag #4 • | Bloß - wo ist jetzt der Unterschied? Was sind die Vor und Nachteile? | | acribio | 2007-09-04 08:47:40 |
Profil
Beitrag #5 • | Wo sind die Unterschiede:
Du hast es genannt: Eichkurve / Eichreihe:
Der Elisa ist quantitativ
der Westernblot ist eher qualitativ.
Beim Western Blot kannst du eine Abschätzung des Molekulargewichts vornehmen. Dies geht beim Elisa nicht. Beim Westernblot wird das Protein zuvor mit denaturierendem SDS behandelt und dann auf dem Gel elektrophoretisch aufgetrennt. Es ist eigentlich erstaunlich, dass danach überhaupt noch ein Antikörper binden kann. -> Verlust der Sensitivität. Der Elisa Assay ist hier schonender und deshalb auch sensitiver. Das wiederum hängt natürlich auch von der Detektionsart ab. Ein Westernblot mit ECL-Detektion hat eine niedrigere Nachweisgrenze als ein WB mit klassischer chemischer Detektion (z.B. mit 4-Chloronaphtol) - der Antikörper spielt natürlich auch eine Rolle.... | | TanjaK | 2007-09-04 13:05:16 |
Profil
Beitrag #6 • | Dankeschön! ;)
wenn ich wieder mal eine Frage habe, dann werde ich gerne wiederkommen | | acribio | 2007-09-04 17:16:37 |
Profil
Beitrag #7 • | Bitteschön ;) | | Beiträge 1 bis 7 von 7 angezeigt. |
