Protein assays |
| Fiorella | 2008-12-11 12:58:37 |
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Beitrag #1 • | Hallo!
Ich befinde mich in der glücklichen Lage bald Protein Chemie Prüfung zu haben. Unser Prof hat es uns leicht machen wollen und uns die Fragen 1 Woche früher überreicht. Dafür sind sie um einiges schwieriger als ich mir erwartet habe, ich hoffe ihr könnt mir helfen:
During process development the Bradford protein assay with BSA (bovine serum albumin) as a standard has been used for protein quantification. Final formulation has been determined to contain 0,1% Tween80 and sucrose. The potency of the product will be determined by the protein assay.
Questions:
1.) Is the Bradford protein assay still applicable?
--tween ist ein "detergent" und in der Konzentration zu hoch um keinen Einfluss auf Bradford zu haben. Also nein,..man muss einen andern nehmen,..soweit so gut
2.) Which protein determination do you suggest?
--BCA wurde in einen Bradford protein assay vorgeschlagen, weil der keinen Einfluss auf "detergents" hat. Andere Vorschläge?
3.) Is BSA as a standard appropriate for accurate protein quantification?
--Wenn die "Reinheit" Standard die gleiche von der Probe ist ja, ansonsten nein, generell gesagt is BSA kein guter Standard, besser wäre IgG der auch kommerziell erhältlich ist. Andere Vorschläge?
4.) Which standard will you use for protein quantification?
--siehe Frage 3
5.) How will you compare the old Bradford results with the results from your new method?
--Die fand ich besonders schwierig, möglich wäre beide Assays also Bradford und BCA mit dem "Goldstandard" Quantitative Amino Acid Assay zu eichen und dann eventuelle Messunterschiede zu vergleichen, aber ich bin mir da echt nicht sicher...
6.) When is it applicable to use the protein assay as a potency test?
--Hmm,..die find ich auch nicht leicht, vor allem welcher protein assay könnte gemeint sein? Nehmen wir einen ELISA an und nehmen wir and das Impfstoffe auf "da sein, oder nicht da sein" analysiert werden, dann kann das auch durchaus ein potency test sein?? Also es würde dann gelten, wenn die Struktur des Proteins teil der potency ist???????
Vielen Dank für jeden Hinweis oder Lösung einiger Fragen!! | | Beiträge 1 bis 1 von 1 angezeigt. |
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