Amylase-Bestimmung - Bestimmung der lebenden Zellen |
| Motzkonova | 2008-05-29 17:14:29 |
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Beitrag #1 • | Hallo, miteinander
Wir machen folgenden Versuch und ich brauche dazu unbedingt noch einen Tip:
Ich soll an einer nicht zählbaren Menge lebender Azinus-Zellen (mit einem variablen Anteil an toten Zellen) die sezernierte Amylase bestimmen. Zunächst messen wir zum Zeitpunkt 0. Dann machen wir eine Stimulation mit verschiedenen Stoffen. Die 2. Messung findet nach 60Minuten statt. Anschließend lysieren wir die Zellen und bestimmen die Amylase-Menge, die in der Zelle geblieben ist und die nicht sezerniert wurde. Aus diesen 3 Messungen bestimmen wir den anteil der intrazellulären Amylase, der bei den verschiedenen Stimulationen sezerniert wurde. Jetzt das Problem: Wir haben immer die sezernierte Amylase auf die im Ansatz vorhandene Total-Protein-menge bezogen. Das "Totalprotein" als Bezugspunkt enthält aber auch die toten Zellen, die keine Amylase während des Versuchs sezerniert haben. Ich wende mich an Euch mit folgender Frage:
Welchen "Lebendparameter" könnten wir bestimmen, der a) leicht meßbar ist (z.B. photometrisch) und b) die Menge der lebenden Zellen widerspiegelt? Ich wäre sehr froh, wenn mir jemand weiter helfen könnte. | | Beiträge 1 bis 1 von 1 angezeigt. |
