Lentiviren für Transfektion |
| Labie | 2010-12-15 18:08:49 |
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Beitrag #1 • | Hallo,
ich möchte eine stabile Transfektion durchführen. Mein gewünschtes Gen sollte überexpriniert werden bzw. induzierbar sein. Dies sollte nach Möglichkeit mit Lentiviren passieren. Nun meine Frage:
wie wähle ich das richtige Plasmid aus?
Bei meiner Recherche im inet habe ich immer solche ganze Kits gefunden, wo auch der Vektor mitgeliefert wird, kann man überhaut einen eigenen Vektor verwenden, wo das gewünschte Gen schon kloniert worden ist?
Die Transfektion muss ja irgendwie stattfinden oder ist das ein Firmengeheimnis??
Ich wiess garnicht, wie genau so eine TRansfektion mit dem Lentivirus von statten geht?
Wäre Euch für hilfreiche Tipps dankbar!!! | | acribio | 2010-12-20 19:59:19 |
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Beitrag #2 • | Hallo Labie
>kann man überhaut einen eigenen Vektor verwenden
Ist denn Dein Gen bereits in einem Lentivirus-Vektor? Wenn nicht, wie willst du dann Dein Gen in das Lentivirus einschleusen?
Ich würde denken, dass es ohne so einen Kit nicht geht, vor allem, wenn man nicht genau weiss wie es geht. Die Lentiviren sind Retroviren, aber die Expression erinnert mich an ein Baculoviren-Expressionsystem
zu Deiner Frage
| Ich wiess garnicht, wie genau so eine TRansfektion mit dem Lentivirus von statten geht? |
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steht hier vielleicht etwas:
http://biology.kenyon.edu/slonc/gene-web/Lentiviral/Lentivi2.html
http://vector.bcm.tmc.edu/Lentivirus/Lentivirus_Vectors.htm
Ich glaube es müssen zuerst die Lentiviren in HEK293 Zellen erzeugt werden. Mit diesen kannst du dann Deine Zellen infizieren. Ähnlich wie beim Baculovirus-Expressionssystem http://www.openbiosystems.com/Viral%20Packaging/TransLentiviral%20Packaging%20Syst/
Hier auch noch allgemeine Infos zu Lentiviren:
http://de.wikipedia.org/wiki/Lentiviren | | Beiträge 1 bis 2 von 2 angezeigt. |
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