RNA Auftragspuffer für Northern blot |
| Jan79 | 2007-07-14 11:37:49 |
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Beitrag #1 • | Guten Tag,
ich suche nach einer Vorschrift für einen Auftragspuffer.
Kann mir vielleicht jemand helfen?
| | acribio | 2007-07-16 10:45:07 |
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Beitrag #2 • | Frisch ansetzen:
400 µl Formamid (säurefrei)
120 µl Formaldehyd (für Molekularbiologie, säurefrei)
60 µl 10x MOPS Puffer (angesetzt mit DEPC Wasser, autoklaviert)
Von dieser Mischung wird ca. 4 µl zur Probe hinzugesetzt (Probenvolumen sollte max. ca. 6 µl sein) und 15 min bei max. 65 °C erhitzt.
Danach wird je Probe 2 µl einer 50 %-igen Glycerin Lsg. mit 0.5 % Bromphenolblau hinzugesetzt und zentrifugiert. Die Proben sind für eine RNA-Geleelektrophorese vorbereitet.
Ethidiumbromid kann separat hinzugesetzt werden. Z. B. 1 µl einer 1:10000 Verdünnung (Hier empfiehlt es sich, die Menge selbst anzupassen)
(in dieser Vorschrift fehlt der 2. Farbstoff, da dieser stets mit einer der ribosomalen Banden interagiert)
| | Jan79 | 2007-07-19 15:12:50 |
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Beitrag #3 • | Danke ;)
hat geklappt | | Beiträge 1 bis 3 von 3 angezeigt. |
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